ترانسفورماسیون برنج به روش کشت جنین بالغ با استفاده از اگروباکتریوم

پایان نامه
چکیده

برنج سهم عمده ای در تامین منبع غذایی، تولید انرژی و تجارت بین المللی دارد. ثابت ماندن میزان عملکرد ارقام اصلاح شده به روش های متداول اصلاحی در طی دهه های گذشته، اصلاح گیاهان را به روش های نوین اصلاح و آزمایشگاهی سوق داده است که دست کاری ژنتیکی گیاهان از جمله ی این روش های نوین اصلاح گیاهان می باشد. اگروباکتریوم ابزاری وام گرفته از طبیعت است که برای دست کاری ژنتیکی گیاهان به وفور استفاده می شود. ترانسفورم به واسطه ی اگروباکتریوم اغلب بر روی بافت کالوس انجام می شود و پس از آن کالوس به گیاه کامل باززایی می شود. بنابراین پیش از تصمیم به ترانسفورم، گیاه مورد نظر باید دستورعمل کالوس زایی و باززایی مناسبی داشته باشد. در این پژوهش چهار رقم برنج بومی هاشمی، گرده، حسنی و غریب به روش کشت جنین بالغ با استفاده از اگروباکتریوم ترانسفورم شد. از آن جا که این چهار رقم دستورعمل کالوس زایی و باززایی روشنی نداشتند، بررسی فرآیندهای کشت بافت آن ها هدف اصلی این پژوهش (ترانسفورماسیون) را تحت تاثیر قرار داد و موجب کند شدن روند برنامه ریزی شده ی پژوهش شد. برای سه محیط کشت کالوس زایی، باززایی، و ریشه زایی از محیط پایه ms، و به ترتیب تیمارهای هورمونی mg/l0.4 = baو mg/l 4 = 2,4-d؛ naa، kn و ba هر یک به میزان mg/l 1؛ و بدون هورمون استفاده شد. به منظور ترانسفورماسیون، سوش اگروباکتریوم eha105 واجد پلازمید pcambia1105.1r پس از سه روز کشت در محیط های مایع lb، ab، و induction (حاوی µm 100 استوسرینگون)، برای سه روز در محیط کشت کالوس زایی حاوی µm 100 استوسرینگون با کالوس های سپرچه ای برنج کشت همراه شد. در نتیجه ی این پژوهش، رقم غریب و هاشمی مناسب ترین رقم، و رقم گرده و حسنی نامناسب ترین رقم به-منظور کالوس زایی، باززایی و ترانسفورماسیون معرفی شدند. نتایج حاصل از این پژوهش برای تحقیقات آتیِ ترانسفورماسیون برنج مفید خواهند بود. در این نوشته تا حد توان و نیاز سعی شد که مفاهیم، روش ها و نتایج به طور دقیق و صریح بیان شوند.

۱۵ صفحه ی اول

برای دانلود 15 صفحه اول باید عضویت طلایی داشته باشید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

ترانسفورماسیون پایدار و آسان جنین بالغ برنج (Oryza sativa L. var. indica) با استفاده از روش In planta

ترانسفورماسیون ژنتیکی برنج با استفاده از اگروباکتریوم (Agrobacterium tumefaciens) رویکردی مطلوب، ضروری و قدرتمند برای انتقال ژن به گیاهان زراعی می¬باشد. در این پژوهش به منظور ترانسفورماسیون گیاهان برنج از روش in planta استفاده شد. بر این اساس، بذور برنج به مدت دو روز خیسانده شدند و سپس سمت مریستم انتهایی بذر که جنین بالغ برنج وجود دارد در مراحل اولیه جوانه¬زنی با سوزن آغشته به محلول اگروباکتریو...

متن کامل

ترانسفورماسیون پایدار و آسان جنین بالغ برنج (Oryza sativa L. var. indica) با استفاده از روش In planta

ترانسفورماسیون ژنتیکی برنج با استفاده از اگروباکتریوم (Agrobacterium tumefaciens) رویکردی مطلوب، ضروری و قدرتمند برای انتقال ژن به گیاهان زراعی می¬باشد. در این پژوهش به منظور ترانسفورماسیون گیاهان برنج از روش in planta استفاده شد. بر این اساس، بذور برنج به مدت دو روز خیسانده شدند و سپس سمت مریستم انتهایی بذر که جنین بالغ برنج وجود دارد در مراحل اولیه جوانه¬زنی با سوزن آغشته به محلول اگروباکتریو...

متن کامل

ترانسفورماسیون مرکبات با استفاده از اگروباکتریوم به منظور تولید گیاهان مقاوم به ویروس تریستزای مرکبات (ctv)

خاموشی ژن پس از رونویسی (ptgs) یک مکانیسم طبیعی است که توسط سلول گیاهی با هدف تخریب توالی نوکلئوتیدی اختصاصی rna علیه آلودگی ویروسی ایجاد می شود. مکانیسم ptgs در حال تبدیل شدن به یک ابزار قدرتمند برای کاهش بیان ژن های ویروسی معین و کنترل آلودگی می باشد. پژوهش حاضر از دو بخش تشکیل شده است. در بخش اول با هدف کنترل ویروس تریستزای مرکبات (ctv)، یک توالی حفاظت شده از ژن پروتئین پوششی این ویروس (cp-p...

15 صفحه اول

ترانسفورماسیون برنج (oryza sativa l.) با ژن epsps با استفاده از آگروباکتریوم به روش in planta.

ژن epsps مسئول کد کردن آنزیم 5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase، یک آنزیم کلیدی در مسیر بیوسنتز اسیدهای آمینه آروماتیک در میکرواورگانیسم ها و گیاهان، می باشد. ترانسفورماسیون ژنتیکی غلات یک ابزار ضروری و قدرتمند برای انتقال ژن می باشد. روش های ترانسفورماسیون مرسوم پیچیده و وقت گیر هستند. تکنیک ترانسفورماسیون بوسیله اگروباکتریوم تومفاشیینس یک رویکرد مطلوب برای انتقال ژن محسوب می گردد. رو...

15 صفحه اول

ریزازدیادی Eucalyptus maculata از پایه بالغ به روش کشت درون‌شیشه‌ای

توانایی رشد سریع اکالیپتوس‌ها سبب شده تا این جنس در جنگل‌کاری، مصارف صنعتی و دارویی اهمیت فوق‌العاده‌ای پیدا کند. گونه درختی  E. maculata Hookاز نظر تولید برخی ترکیبات شیمیایی و مصارف دارویی نسبت به سایر اکالیپتوس‌ها از اهمیت خاصی برخوردار است. از طرفی به دلیل مشکلات تکثیر جنسی و غیرجنسی این گونه، در این تحقیق امکان تکثیر این گیاه به روش کشت ‌درون‌شیشه‌ای با استفاده از ریزنمونه‌های پایه بالغ مو...

متن کامل

تولید دو رگه‌های بین گونه‌ای بین سفیدپلت (Populus caspica) و صنوبر نیگرا (Populus nigra) با استفاده از کشت جنین بالغ

کشت جنین بالغ برای تولید دورگه‌های بین گونه‎ای بین گیاه سفیدپلت (Populus caspica) با صنوبر (P. nigra) مورد استفاده قرار گرفت. گرده‎افشانی دستی بر روی گل ماده شاخه‌های گلدار سفیدپلت با دانه گرده صنوبر نیگرا در قالب سیستم اصلاحی ترکه و آب انجام شد. تخمدان‎های بوجود آمده در سنین مختلف (10، 14 و 21 روز پس از گرده‎افشانی)، ایزوله و برای جوانه‎زنی جنین در شرایط سترون به محیط کشت MS فاقد هورمون‎های رش...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


نوع سند: پایان نامه

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه گیلان - دانشکده علوم کشاورزی

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023